Electroforesis desnaturalizante SDS-PAGE

• Cuando se realizan corridas de la misma muestra en ausencia y presencia del reductor, se pueden identificar bandas que desaparecen y en su lugar dos o más aparecen.
• Esto es síntoma de proteínas con estructura cuaternaria, estabilizada por disulfuros.

banda que desaparece*

bandas que aparecen

*proteína con subunidades unidas por un

-S-S-

Notes:

En esta técnica que se llama electroforesis desnaturalizante y que se abrevia: SDS-PAGE (denaturaing ployacrilamide electrophoresis).

Lo estándar es añadir a la muestra 2-mercaetanol y calentarla a 65ºC por 5 minutos, con el fin de romper los enlaces de disulfuro.

Al permitir la separación completa de las subunidades de proteínas, con estructura cuaternaria estabilizada por uno o más disulfuros, podemos cambiar su migración.

La comparación de un gel en condiciones reductoras con otro en condiciones no reductoras permite identificar a proteínas con dicha característica.

Aquí un ejemplo de un gel en forma esquemática.