5b. Cálculo del valor numérico de Ki, gráfico primario

a) de la gráfica de Lineweaver-Burk hay que leer el valor

de las pendientes y de los interceptos al eje “Y” a cada

concentración de Inhbidor (la primera es 0)

b) Hacer una tabla:

[I] Pendiente Intercepto

0 m0 b0

I1 m1 b1

I2 m2 b2

...etcétera

Recordemos el factor (1+ [L]/KL). El componente competitivo afecta la pendiente con el factor (1+ [I]/KIC), mientras que el acompoetitivo afecta la intercección con la ordenada con el factor (1+ [I]/KIU). Es decir, en presencia de un inhibidor no competitivo general tendremos:

Que son rectas del tipo:

Notes:

Un segundo método es determinar el valor de la pendiente y el intercepto en “Y” en el gráfico de Linewaver-Burk, para todas las rectas correspondientes a las concentraciones de inhibidor empleadas, incluyendo el caso en que no se añade inhibidor (referencia control).

Se ilustra aquí el caso más general de la inhibición mixta en que se requiere determianr VMAX, KM, KIC y/o KIU.

Lo primero es tabular los valores de las pendientes e interceptos a cada concentración de inhibidor empleada.

Estos valores deben conrresponder a dos líneas rectas del tipo: Parámetro igual al Valor REAL sobre KI, por concentración de inhibidor, más el parámetro REAL.